Theo như tôi được biết có những loại điện di protein như sau:
+Một chiều: SDS-PAGE, Native-PAGE, gradient hoặc không gradient, IEF (bước đầu của điện di 2 chiều)
+Hai chiều
Biến tính là làm protein tan, chỉ còn mạch đơn và thẳng (dùng SDS, mercaptoethanol, Dithiothreitol, urea, diurea...v.v và nói chung không thể hồi tính còn không biến tính là protein có thể biến tính tạm thời để chạy điện di (ví dụ cho pH cao để nó tích điện âm) rồi sau đó hồi tính.
Điện di không biến tính (native-PAGE) thường là để tinh sạch protein hoặc kiểm tra độ sạch, vì protein sau đó có thể thu hồi lại được và đem đi refold.
Điện di biến tính hay dùng để tính trọng lượng phân tử (mặc dù chỉ là tổng của từng tiểu phần)
Ngoài ra còn nhiều kỹ thuật khác nữa. Nói đơn giản thế này: cứ phương pháp nào làm protein di động nhờ điện trường thì gọi là điện di protein. Từ đó có thể suy ra có nhiều phương pháp lắm.
Ví dụ: có thể chia các kiểu điện di theo chất nền (agarose hay acrylamide hay màng cellulose acetate...), theo chiều (điện di 1 chiều, 2 chiều), theo kiểu (điện di đứng, điện di ngang, điện di mao quản...), theo một số phương thức bổ trợ khác (điện di thường, Immunoelectrophoresis, Affinity electrophoresis...), theo điện trường áp dụng (Pulsed field gel electrophoresis hay một chiều điện trường), theo phương thức xử lý mẫu native hay denature).....
Nói chung là rất nhiều. Tùy từng đối tượng sẽ có lựa chọn phù hợp.
Phân biệt giữa 2 điều kiện denature và non-denature trong điện di proten thì bác Lương đã nói. Bạn có thể tự tìm thêm thông tin rồi post lên đây mọi người sẽ góp y.
Chào Trung,
- Trong quá trình chạy điện di denature (SDS-PAGE) sẽ dùng ít nhất một trong các chất : SDS hay các chất khử như beta-mercaptoethanol, Dithiothreitol, urea, diurea hoặc các tác nhân gây biến tính khác: nhiệt độ, pH...
- Còn chạy non-denature (NATIVE-PAGE): không dùng các chất trên và tác nhângây biến tính protein.
Dùng chúng khi:
- SDS-PAGE:muốn xác định độ tinh sạch, xác định trọng lượng phân tử, phát hiện số lượng subunit của phân tử protein...
- NATIVE-PAGE : thường dùng để �phát hiện được các isomer
Một số ý kiến trao đổi cùng bạn! Mong ý kiến từ các bạn.
Bạn đang đọc truyện trên: Truyen2U.Pro